PCR(聚合酶鏈反應)技術現已成為分子生物學研究中的技術。但有時我們在PCR結果輸出中可能無法解釋出現了錯誤結果,這時候就有可能是由PCR污染引起的。那么如何治理PCR污染呢?下面就來詳細介紹一下PCR污染治理的方法。
1、保持實驗環境的清潔
PCR環境需要保持完全干凈,同時實驗中使用的材料也要保持無菌、無加工痕跡,否則可能對PCR結果有影響。實驗室應該保證充足的通風,避免實驗中人員呼出氣體的影響。另外,應戴手套和口罩等防護措施,避免外部細菌和病毒污染。
2、設定嚴密的操作流程
在實驗操作過程中,應實施嚴格的操作流程,確保每個步驟都嚴格按照操作指南進行,不要擅自修改操作流程,避免病毒和細菌的污染。
3、實施良好的PCR試劑制備
PCR試劑是PCR實驗的重要組成部分。根據廠家提供的說明,可以使用真空吸水裝置或電動吸水裝置,使樣品全都吸入管中。制備時需要使用RNAase-free試劑,在試劑制備之前,使用去離子水沖洗它們。并且每次制備之后都必須對PCR試劑使用UV照射,以確保試劑應變。
4、正確的PCR擴增條件和控制實驗結果
不同的擴增條件會影響PCR結果,因此在實驗過程中必須對擴增條件進行有效的控制。同時,為了避免PCR污染,建議實驗前在實驗室里放置一個負對照,建議進行一定的負對照操作。
5、PCR產物電泳時使用大量的復檢
PCR污染主要是由產物引起的,因此在進行PCR產物電泳前,不僅要進行復式檢測,而且要在不同步驟進行多次檢查。此外,對于濃縮的PCR產物,我們也必須先稀釋后再進行電泳。
總之,PCR技術在分子生物學中扮演著十分重要的角色,而PCR污染也時有發生。因此,為了確保PCR實驗結果準確和可靠,我們必須遵循嚴格的操作流程和預防措施來治理PCR污染。